【实验材料】
1. 显微镜、显微镜用油、二甲苯、擦镜纸。
2. 小肠切片、食管切片、疏松结缔组织铺片、血涂片、骨骼肌切片、神经细胞(脊髓
横切片)。 【实验内容和方法】
1. 单层柱状上皮(小肠切片 HE染色)
⑴肉眼观察:观察肠腔粘膜面,可见高低不平,有许多突起。
⑵低倍镜观察:粘膜面凹凸不平,选择结构典型的上皮移至视野中央,可见排列整齐、密集的单层柱状上皮。
⑶高倍镜观察:细胞呈柱状,排列整齐,细胞质呈粉红色,细胞核呈椭圆形,位于细胞的靠近基底部,呈深蓝色。在柱状细胞间可见杯状细胞,因制片缘故呈空泡状。
⑷镜下绘图:在高倍镜下绘出单层柱状上皮的游离面、基底面及基膜、细胞质、细胞核、杯状细胞。
2. 复层扁平上皮(食管横切片 HE染色)
⑴肉眼观察:切片呈环形,靠近管腔面有深染的部分就是食管的复层扁平上皮。 ⑵低倍镜观察:上皮细胞层数很多,排列紧密,细胞质呈粉红色,细胞核呈深蓝色。 ⑶高倍镜观察:浅层细胞扁平形,细胞核扁圆形;中层细胞多边形,体积大,细胞核呈圆形,细胞界限清晰;基底部一层细胞呈立方形或低柱状,细胞核椭圆形,染色深,整齐地沿着基膜排列。
3.疏松结缔组织(铺片 HE染色)
⑴肉眼观察:标本呈淡紫红色,纤维互相交织成网状。选择标本较薄(染色淡)部位进行镜下观察。
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⑵低倍镜观察:胶原纤维和弹性纤维交织成网状,细胞分散其间呈蓝点状。
⑶高倍镜观察:胶原纤维粗大呈淡红色,弯曲呈波纹状;弹性纤维呈细丝状,有分支。成纤维细胞数量最多,细胞质淡红色,细胞核椭圆形,紫蓝色。
4.血细胞(血涂片 瑞氏染色) ⑴肉眼观察:血涂片染成粉红色。
⑵高倍镜观察:几乎都是红细胞,红细胞呈红色,圆形,偶见白细胞。
⑶油镜观察:①红细胞染成淡红色,中央部色浅,周围部色深,无细胞核。②中性粒细胞体积比红细胞大,细胞质淡红色,可见紫红色的细小颗粒,细胞核呈紫篮色,分成2~5叶不等,核叶间有细丝相连。③淋巴细胞较小,细胞质少,细胞核大呈圆形,往往一侧有凹陷,染成深蓝色。④血小板呈不规则的紫蓝色小体,成群分布。
⑷镜下绘图:绘出红细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板。 5.骨骼肌(舌肌切片 特殊染色) ⑴肉眼观察:标本呈蓝色长条状。
⑵低倍镜观察:骨骼肌纤维呈细长的圆柱状,有明暗相间的横纹。细胞核呈扁椭圆形,深蓝色,位于肌膜的深面,数量较多。肌纤维之间有少量的结缔组织。
⑶高倍镜观察:肌纤维内有许多纵行的线条状结构,即肌原纤维。下降聚光器,在暗视野下观察肌原纤维及其明带和暗带,肌细胞核的位置和形态。
6.多极神经元(脊髓横切片 特殊染色)
⑴肉眼观察:标本呈椭圆形,中央深染的部分为灰质,周围浅淡的部分为白质。 ⑵低倍镜观察:在灰质前角内可见深黄色多突起的细胞,即多极神经元,有小而圆的是神经胶质细胞的核。
⑶高倍镜观察:多极神经元的胞体不规则,突起多已被切断,可呈星形、多角形,只能
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见到突起的根部,且不易区别它是树突还是轴突,细胞核位于中央,大而圆,染色淡。
【注意事项】
⒈显微镜稳固在台面,利用反光镜将光线反射入物镜(强光下用平面镜,弱光下用凹面镜)。
⒉组织切片铺贴在载玻片上,并盖有小玻片。把组织切片放置载物平台上时,一定要将盖有小玻片朝上,有利于高倍镜观察。
⒊用红蓝铅笔绘制高倍镜下的细胞图,注意细胞质、细胞核。
实验X ABO血型的鉴定
【实验目的】
学会用玻片鉴定ABO血型,并说明注意事项,根据结果确定血型,加深理解血型分型的依据及鉴定血型的意义。
【实验原理】
用已知的标准血清的抗体去测受检者红细胞膜上未知的抗原,根据是否发生凝集反应来确定血型。
【实验材料】A型、B型标准血清、生理盐水、采血针、小试管、吸管、双凹玻片、玻璃蜡笔、75%酒精棉球、干棉球、竹签、放大镜或显微镜。
【实验方法和步骤】
⒈取一干净双凹玻片,凹面朝上,用玻璃蜡笔在两端分别标记A、B字样。
⒉在A端小凹中滴入A型标准血清一滴,又在B端小凹中滴入B型标准血清一滴,注意不可混淆。
⒊用75%酒精消毒耳垂或指端后,再用消毒采血针刺破皮肤,取1~2滴血加入盛有1ml生理盐水的小试管中混匀,制成红细胞混悬液。
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⒋用吸管吸取红细胞混悬液,分别向A、B两端的小凹内各加一滴,并用竹签使其充分搅匀。放置10~15分钟后,用肉眼观察有无凝集现象,如肉眼不易分辨,可用放大镜或显微镜低倍观察。
⒌根据有无凝集现象判定受检者血型。 【注意事项】
⒈采血针和采血部位必须严格消毒,以免感染。
⒉制备的红细胞混悬液不能过浓或过稀,以免出现假结果。
⒊滴标准血清的滴管和用于搅拌的竹签各两支,必须专用,两种标准血清不要混淆。 ⒋注意区别凝集现象,还是红细胞沉淀。红细胞凝集时,肉眼观察呈朱红色颗粒状,且液体变得清亮。
ABO血型测定 【实验要求】 ⒈实验结果记录:
受检者姓名 性别 班级 学号
A型标准血清中 现象;B型标准血清中 现象;血型判断为 型。⒉讨论为什么输同型血还必须做交叉配血试验?
⒊在无标准血清情况下,能否用已知A型血或B型血来鉴定血型?为什么?
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