主要培养基的配制
LB液体培养基
胰蛋白胨 10 g，酵母浸出物 5 g，氯化钠 10 g，蒸馏水 1000 ml，用 1 mol/L HCl 调节 pH 至 7.4，121℃高压灭菌 20 min。如果需要加抗生素，则待灭过菌的培养基温度降到 55℃以下后加入适量的抗生素储存液。
LB 固体培养基
在LB液体培养基中加入2%琼脂。
DMEM细胞培养基
DMEM溶液90%(v/v)，FBS 10%(v/v)，青霉素100U/ml，链霉素100 ?g/ml
McCoy’s 5A细胞培养基
McCoy’s 5A溶液90%(v/v)，FBS 10%(v/v),青霉素100 U/ml，链霉素100 ?g/ml
实验试剂及药品的配制
1 mol/L Tris-HCl (pH8.0)
在800 ml的双蒸水中溶解Tris(三羟甲基氨基甲烷)121.1 g，用浓盐酸调pH至8.0，用双蒸水定容至1000 ml。121℃高压灭菌15 min，备用。
TE 缓冲液(pH8.0)
1 mol/L Tris-HCl(pH8.0)10 ml和500 mmol/L EDTA(pH8.0)溶液2 ml，用双蒸水定容至1000 ml。121℃高压灭菌15 min，备用。
500 mmol/L 乙二铵四乙酸二钠(EDTA)溶液(pH8.0)
在 800 mL 的双蒸水中加入18.6 g 乙二铵四乙酸二钠，充分溶解后，用10 mol/L NaOH 溶液调pH 至8.0，用双蒸水定容到1000 ml。121℃高压灭菌 15 min，备用。
溴化乙锭(EB)
1 g EB，加入100 ml 灭菌双蒸水中，磁力搅拌数h以确保其完全溶解，然后转入棕色瓶中，4℃保存。
TAE 电泳缓冲液(50×)
242 g Tris碱，57 ml冰乙酸，100 ml 0.5M EDTA，加灭菌去离子水定容至 1000 ml，使用时稀释50倍。
10% SDS
将10 g高纯度的SDS置于烧杯中，加入约 80 ml的ddH2O，68℃加热溶解，滴加盐酸调节pH值至7.2，定容至100 ml后，室温保存。
G418 (Neomycin)
用PBS (pH 7.4) 配成浓度为50 mg/ml的原液，0.22 ?m滤膜过滤除菌，分装储于-20℃备用。
基因组DNA提取液
1 mmol/L Tris-HCl (pH8.0)1 mL和0.1 mol/L EDTA (pH8.0)溶液20 ml， 0.5% (m/v) SDS，加灭菌去离子水定容至100 ml，备用。
蛋白提取液
1M Tris-HCl (pH7.6) 5 ml，5 M NaCl 3 ml，10%SDS 1 ml，100% NP-40 1 ml，加灭菌去离子水定容至100 ml，备用。
100 mM 姜黄素
用DMSO配成浓度为100 mM的储存液，分装避光储存于-20℃备用。
100 mM CPT-11
CPT-11原装瓶为50 mg，加入802 ?l DMSO溶解，分装储存于-20℃备用。
100 mM DHA
DHA原装瓶为50 mg，加入1758 ?l DMSO溶解，配成浓度为100mM的储存液，分装避光储存于-20℃备用。
100 mM 5-Fu
用DMSO配成浓度为100 mM的储存液，分装避光储存于-20℃备用。
实验方法
细胞冻存（HEK293细胞为例）
1. 消化细胞并700rpm离心5min收集细胞；
2. 吸除上清，沉淀用冻存培养基（80% DMEM，10?S，10%DMSO，现配现用）充分重悬；
3. 将细胞悬液分装至冻存管中，1ml/管，标注细胞名称/型号、代数、日期、操作者，并迅速放于室温的冻存盒内； 4. -80℃过夜，然后转移至液氮罐中冻存。
细胞复苏（HEK293细胞为例）
1. 将冻存的细胞迅速从液氮罐中取出，放入37℃水浴中进行溶解至无冰晶；
2. 将细胞悬液转移至15ml无菌离心管中。逐滴加入5ml完全培养基，边滴加边充分摇动； 3. 700rpm离心5min收集细胞；
4. 吸除上清以2ml完全培养基来重悬细胞沉淀并转移到6孔板中进行培养。
总RNA提取
1) 2)
弃12或6孔板中的原Medium后，PBS 500 ul/孔洗两次.
TRIzol 1 ml/孔（组织经匀浆处理后每100 mg加入1ml的Trizol）。吹打混匀后转移到相应的做好标签的好的1.5 ml的离心管中，并立即放在冰上以防RNA降解，5 min. 3)
氯仿 200 ul/管，剧烈震荡15 s （Don’t Vortex！），使细胞充分裂解,室温静止3 min. 4) 5)
4℃，12000 rcf，15 min.
转移500 ul上清到相应的做好标记的1.5 ml的离心管中，加入500 ul/管异丙醇，颠倒混匀，室温静止10 min。4℃，12000 rcf，15 min. 6)
弃上清，加入用DEPC水配好的75%的乙醇1 ml/管，颠倒两次后，放4℃离心机，7500 rcf，5 min. 7)
弃上清，等RNA干燥透明后加入30 ul的DEPC水，吹打混匀使得RNA溶解后，1% 凝胶电泳分析（100V 15-20 min），置于-80℃冰箱保存。