附录一、药物溶出、释放比较研究基本方法 一、基本原则
药品获准上市后，溶出度或释放度检查是药品生产和质量控制的 一项重要内容，对保证批间产品质量一致性有重要作用。当药品处方、 生产工艺、生产地点和生产规模等发生变更后，溶出度或释放度检查 是比较变更前后产品相似性或差异程度的重要工具和研究工作的重 要内容。对于口服固体制剂微小的处方、工艺、产地等方面变更，一 般通过溶出度和释放度比较研究已足以证明变更后产品质量的一致 性。
溶出度或释放度检查方法需符合药典有关规定。如采用原上市注 册时未采用的方法，需进行方法学验证，注意研究这些方法对区分药 品质量及体内行为的分辨能力。 二、溶出比较研究基本方法
口服固体制剂给药后体内吸收主要依赖于制剂中药物溶解、溶出 及药物在胃肠道的渗透性等方面，基于这一过程中药物溶解、溶出的 重要性，体外药物溶出行为与体内药物吸收在某些情况下是相关的。 药物的水溶解性、药物对肠壁的渗透性是溶出比较研究中需要注意的 问题，不同特性的药物研究工作侧重点不尽相同。
药物水溶解性、渗透性本文附注有相应说明，具体界定及研究工 作可参照相关技术指导原则进行。
如果无法判定药物是属于高渗透性，还是低渗透性的，建议根据 药物的水溶解性，分别参照下述1.2 项或1.3 项进行变更前后溶出行 60
为比较研究。 1 实验方法
1.1 原料药属于高溶解性，高渗透性的
一般认为餐后胃平均保留（排空）T50%是15-20 分钟。因此，当 此类药物在在0.1N 盐酸中15 分钟溶出85%以上时，一般认为药物体 内吸收速度与程度不再依赖于胃排空速率，这种情况下，只要处方中 没有显著影响药物吸收的辅料，药品不会再有任何生物利用度方面的 问题。反之，如果药物溶出比胃排空速率慢，则需要在多种介质中对 药物溶出行为进行考察。
此类药物溶出比较建议首先选择在900mL0.1N HCl 中进行，可采 用药典收载的转蓝法（转速100rpm），也可选择药典收载的桨法（转 速50rpm）。如果15 分钟内药物溶出85%以上，则不需要再比较其他 pH 条件下或介质中药物溶出情况。
如果15 分钟内药物溶出未达到85%，则需要按下述1.2 或1.3 对变更前后溶出行为进行比较。 1.2 原料药属于高溶解性，低渗透性的
此类药物由于渗透性低而溶解性好，药物的渗透性是体内吸收的 限速步骤，而主要不取决于制剂的溶出。因此， 一般不需要在不同 PH 条件下考察产品变更前后溶出情况。溶出比较研究可选择质量标 准中规定的检查方法进行，如标准中未收载溶出度检查方法，可选择 产品申请上市注册时质量研究和稳定性考察中选择的溶出度检查方
法。 61
一般每批样品至少采用12个剂量单位（如片剂为12片，胶囊为12 粒）进行测定，除0时外，一般至少选择3个时间点进行测定，如5、 15、30、45min，或采用其他适宜的时间间隔取样，直到药物溶出90% 以上或达到溶出平台，计算各时间点药物溶出百分比，绘制每批样品 药物溶出曲线。除0时外，第1个时间点的变异系数不得过20%，从第2 个时间点至最后1个时间点的溶出结果的变异系数应小于10%[参考文献6]。 各批样品测试需采用相同的仪器，尽可能在同一天进行。 1.3 原料药属于低溶解性、高渗透性的
由于此类药物渗透性高，药物的溶出过程可能是体内吸收的限速 步骤，因此，建议考察不同PH 条件下变更前后产品溶出情况，可选 择水、0.1N 盐酸及pH 4.5-7.5 缓冲液三种介质进行比较。对于胶囊 或含明胶包衣的片剂，可采用含酶的人工胃液或人工肠液进行。如无 特殊情况，溶出比较研究一般不使用含有机溶剂的介质（如乙醇-水 体系）进行。如有充分的依据，介质中可使用适量的表面活性剂。如 果原料药或处方中辅料属于PH 非敏感型的，溶出曲线比较可仅采用 2 种缓冲体系进行。
一般每批样品至少采用12个剂量单位（如片剂为12片，胶囊为12 粒）进行测定，除0时外，一般至少选择3个时间点进行测定，如5、 15、30、45min，或采用其他适宜的时间间隔取样，直到药物溶出90% 以上或达到溶出平台，计算各时间点药物溶出百分比，绘制每批样品 药物溶出曲线。除0时外，第1个时间点的变异系数不得过20%，从第2 个时间点至最后1个时间点的溶出结果的变异系数应小于10%[参考文献6]。 62
各批样品测试应采用相同的仪器，尽可能在同一天进行。 2 比较方法
变更前后溶出曲线比较可采用适宜的统计学方法进行。如果可以 提供充分的依据和数据分析，这些证明溶出行为相似性的统计学方法 都是可以接受的。
溶出曲线比较可采用模型依赖法，即一些用于描述药物溶出曲线 的数学模型，如线性模型、Weibull 模型等。进行此类统计学比较， 一般先根据变更前的代表性批次的溶出曲线，选择最合适的模型，建 议采用不超过三个参数的模型（例如线性、二次方、对数、概率和 Weibull 模型），再对模型的参数进行统计学比较，基于对已批准的 标准批次的测试单位（例如胶囊或片）的匹配模型的参数变化设置相 似区间，以测试批次和参比批次间的模型参数计算MSD，估计在两个 批次间真实差别的90%可信区间，比较可信区间和相似区间的限度。 如果可信区间是在相似区间的范围内，则认为测试批次与参比批次有 相似的溶出曲线。
溶出曲线比较也可选择非模型依赖方法，如可通过计算相似因子 f2 比较变更前后溶出行为的相似性，当f2 数值在50-100 范围认为 两条溶出曲线是相似的。 f2=50log{[1+（1/n）∑t=1
n（Rt-Tt）2]-0.5100}
上述公式中n 为时间点（n≥3），Rt 是变更前制剂药物溶出平均百 分数，Tt 是变更后制剂药物溶出平均百分数。采用相似因子比较法需 满足以下条件： 63
●取样时间点除0 时外，至少有3 个 ●每个处方样品至少采用12 个剂量单位 ●只能有一个时间点药物溶出达到85%以上
●从第2 个时间点至最后1 个时间点溶出结果的变异系数应小于 10%
●保证药物溶出90%以上或达到溶出平台
如果药物在15min内溶出达到85%以上，可以认为两批产品溶出行 为是相似的，不需要通过统计学方法对数据分析判定。 三、释放研究比较基本方法 1 实验方法 1.1 缓释、控释制剂
缓释、控释制剂处方、工艺、产地等变更可能对产品质量产生显 著影响，需注意对变更前后不同PH条件下药物释放情况进行全面考察 和了解。除质量标准中规定的释放度检查方法外，释放行为比较研究 建议另外选择至少三种介质进行，如水、0.1N盐酸、pH4.5及pH 6.8 的缓冲液。在有充分依据的情况下，释放介质中可使用适量的表面活 性剂。
一般每批样品至少采用12 个剂量单位进行测定，除0 时外，建 议在开始检查后1、2、4 小时（4h 后每间隔2 小时）取样直到药物 释放80%以上或达到稳态[参考文献4]，计算各时间点药物释放百分比，绘 制每批样品药物释放曲线。各取样时间点变更前后样品药物释放数据 的平均值之差应小于15%[参考文献4]。 64
各批样品测试需采用相同的仪器，尽可能在同一天进行。 1.2 肠溶制剂
肠溶制剂处方、工艺、产地等变更后，需注意对变更前后人工胃 液及人工肠液中药物释放情况进行全面考察。除质量标准中规定的释 放度检查方法外，建议采用标准中规定的释放度检查仪器，依次考察 在0.1N 盐酸中（2 小时）及pH4.5-7.5 缓冲液中药物释放情况，除 质量标准中释放度检查规定的转速外，需考察其他两种转速条件下药 物释放情况。例如，如果标准中释放度检查采用转篮法，则转速可选 择50、100、150rpm 进行考察；如标准中释放度检查采用桨法，转速 可选择50、75、100rpm。
一般每批样品至少采用12 个剂量单位（如片剂为12 片，胶囊为 12 粒）进行测定。取样时间除0 时及在0.1N 盐酸中考察2 小时外， 可在缓冲液中15、30、45、60、120 分钟取样，或采用其他适宜的时 间间隔取样，直到药物溶出80%以上或达到稳态[参考文献4]，计算各时间 点药物溶出百分比，绘制每批样品药物释放曲线。各取样时间点变更 前后样品药物释放数据的平均值之差应小于15%[参考文献4]。
各批样品测试应采用相同的仪器，尽可能在同一天进行。 2 比较方法
变更前后释放曲线比较可采用适宜的统计学方法进行。释放曲线 比较可选择模型依赖法，如通过对各时间点释放百分数与时间进行线 性回归，再对Weibull函数的参数进行统计学比较。此外，也可采用 非模型依赖方法，如通过计算相似因子f2的方法比较变更前后释放行 65
为的相似性，当f2数值在50-100范围，则认为两条释放曲线是相似的。 f2=50log{[1+（1/n）∑t=1 n（Rt-Tt）2]-0.5100}
上述公式中n 为时间点，Rt 是变更前制剂药物释放平均百分数， Tt 是变更后制剂药物释放平均百分数。采用相似因子比较法需注意满 足以下条件：
●取样时间点根据剂型特点及产品特点合理设置（详见正文） ●每个处方样品至少采用12 个剂量单位
●从第2 个时间点至最后1 个时间点溶出结果的变异系数应小于 10%，且各取样时间点变更前后样品药物释放数据的平均值之差应小 于15%
●保证药物释放80%以上或达到溶出平台 【附注】 1 药物的水溶解性
主要反应药物在生理PH 条件下的溶解性情况。研究工作一般在 37±1℃条件下，pH1—7.5 的水性介质中进行测定，绘制被测药物的 pH—溶解度曲线。可根据药物的离子化特性选择pH 测定点，例如， 当药物的pka 为3—5 时，药物的溶解度建议在pH=pka, pH=pka+1, pH=pka-1, pH=1 和pH=7.5 处测定。药典收载的缓冲溶液可用于药物 溶解度的研究。
药物水溶解性可根据pH1—7.5 范围溶解药物单次最大给药剂量 的介质的体积来决定。在pH1—7.5 范围，如果单次最大给药剂量的 药物可溶于不多于250 ml 的介质中，则该药物认为是高溶解性的。 66
2 药物的渗透性
药物渗透性分类以测定药物透过人体肠壁膜量为直接依据，而药 物在人体吸收程度（指药物吸收比例，而不是系统生物利用度）只是 间接依据。
药物渗透性的测定可采用人体实验方法或其他能预测药物体内 吸收程度的非人体实验方法。人体实验方法包括质量平衡法、绝对生 物利用度法和小肠灌流法等。利用未标记稳定同位素或标记放射性同 位素进行的药物药代动力学质量平衡研究可以反映药物的吸收程度， 但对多数药物研究结果显示，此方法测定结果变异程度大，一般优先 考虑采用其它方法。以静脉注射给药为对照，测定口服给药的绝对生 物利用度某些情况下可以间接反映药物吸收情况，如无法证明药物在 胃肠道内是否稳定的情况下，药物吸收程度达到90%以上时，该药物 被认为是高渗透性的。其他能预测药物体内吸收程度的非人体实验方
法也可作为判定药物渗透性的依据，如使用适宜的动物模型进行体内 或在体灌肠研究，使用人或动物肠组织切样进行体外渗透性实验，体 外表皮单细胞培养通透性实验。上述实验可参照相关技术指导原则进 行。考虑药物在透过胃肠壁膜前可能会有部分降解，为证明药物从胃 肠道消除是由于药物透过胃肠壁膜而不是发生降解，研究中需注意考 察药物在胃肠道中的稳定性。多数情况下，一种实验方法已经可以说 明药物的渗透性（如90%以上的药物可在尿中回收）。当一种方法不 能确定药物的通透性时，可用两种不同的方法。此外，药物的化学结 构或某种理化性质（如分配系数等）也可为药物渗透性提供有用的信 67 息。
对于前体药物，其渗透性取决于前体药物向药物转化的机制和部 位。如果前药在透过肠壁膜后转化为药物，则需测定前药的渗透性； 反之，如果前药在胃肠道内已就转化为药物，则应测定药物的渗透性。 附录二、免除人体生物等效性研究的一般考虑 一、基本原则
原料药或制剂变更可能对药品质量、安全性和有效性产生一定影 响，当这种影响较显著时，通过体外质量比较性研究等工作可能还无 法判定变更前后产品的等效性，需考虑进行相关生物学方面研究工 作，如生物等效性研究，以考察变更后体内药物吸收情况，保证变更 前后产品质量、安全性及疗效的一致性。
一般只有以下情况可以考虑申请免除生物等效性研究。其一，根 据剂型特点、辅料的性质、药物性质等因素，可以考虑免除生物等效 性研究。其二，普通口服固体制剂某些情况下，通过相关实验工作及 资料的支持，可以考虑免除生物等效性研究。本文重点阐述上述两种 情况免除生物等效性研究的一般性考虑和基本原则，但不涵盖治疗指 数窄的药物。
对于缓释、控释及肠溶等特殊释放口服固体制剂，变更对药品有 较显著影响的，一般需考虑进行生物等效性等研究。只有存在明确的 体内外相关的条件下，方可考虑免除生物等效性研究，具体可参照相 关技术指导原则进行，本文不作详述。 68
二、一般可以考虑免除生物等效性研究的情况
对于下列药品变更，根据其剂型特点、辅料的性质、药物性质等 因素，一般可以考虑免除生物等效性研究。
1 简单的静脉注射用水溶液（静脉给药注射液、输液），但不包括微 束、脂质体等“复杂”的注射用水溶液。
2 简单的肌肉注射或皮下注射水溶液，处方中辅料变更应不影响药物 吸收行为。
3 人工泪液、润滑剂、灌洗液及漂洗液等一般不认为含有药理活性成 分的简单或复杂溶。
4 不含有可能显著影响产品在胃排空或吸收的辅料的非混悬型口服 溶液
5 药品中活性物质仅在局部发挥作用，无全身吸收的