湖南省肿瘤医院 检验科 Clin Lab.HNZL 标题：粪便标本细菌学检验标准操作规程 文件编号：版本号：2 HNZLYY/LAB-SOP-WSW-607 生效日期：2013-07-01 编制人：陈建国 批准人：吴白平 审核人：肖平 修改号：0 发行部门：质量管理小组 页码：第 41 页 共 62 页 志贺氏菌属检验程序
标本（肛拭、粪便） GN肉汤增菌培养35°C 18-24h
SS、MAC（分离培养）
35°C 18-24h
可疑菌落
初步鉴定：TSIA,KIA,MIU以及药敏试验
35OC 18-24h
动力、H2S均为阴性者
全套生化反应
用志贺氏菌各型血清作玻片凝集试验
+ －
分型血清玻片凝集 乳糖＋石蜡（厌氧） 福氏单价因子血清 肌醇、水杨酸、枸橼酸 鲍氏单价因子血清 继续分离、鉴定。 志贺单价因子血清 史密单价因子血清 宋内单价因子血清
湖南省肿瘤医院 检验科 Clin Lab.HNZL 标题：粪便标本细菌学检验标准操作规程 文件编号：版本号：2 HNZLYY/LAB-SOP-WSW-607 生效日期：2013-07-01 编制人：陈建国 批准人：吴白平 审核人：肖平 修改号：0 发行部门：质量管理小组 页码：第 42 页 共 62 页 分型鉴定报告 （传染病报告）
沙门菌属检验程序
标本（血液、骨髓、尿、粪便） SF、GN肉汤增菌培养350C 18-24h
BAP,MAC,SS,（分离培养）
35C 18-24h
可疑菌落
初步鉴定：TSIA,KIA,MIU,IMVC
35C 18-24h
符合沙门菌生化、血清作玻片凝集反应（A_F多价）分群 药敏试验
粗糙型菌落
琼脂斜面 肉汤盐水1：1培养 全套生化反应 35°C 18-24h 35C 18-24h 35C 18-24h
°
°
°°
伤寒(A—F多价)、单价血清定型
卫矛糖 分型血清玻片凝集 肌醇 “O”因子血清 木糖 “H”因子血清
湖南省肿瘤医院 检验科 Clin Lab.HNZL 标题：粪便标本细菌学检验标准操作规程 文件编号：版本号：2 HNZLYY/LAB-SOP-WSW-607 生效日期：2013-07-01 编制人：陈建国 批准人：吴白平 审核人：肖平 修改号：0 发行部门：质量管理小组 页码：第 43 页 共 62 页 分型鉴定结果报告 （传染病报告）
霍乱弧菌检验程序 标本（粪便，肛拭）
直接分离培养 增菌培养
TCBS,SS平板 碱性蛋白胨水6-8小时
35°C 18—24h
分离培养（TCBS）
35°C 18—24h
黄色菌落
涂片，G,S染色：革兰阴性弧菌。 1．动力试验：镜下压滴法，穿刺样流动。 2．制动试验：加入霍乱抗血清，流动终止。 3．氧化酶试验：＋
4．血清学反应：霍乱多价凝集。 5.O139血清凝集。 6.盐水对照 7.因子血清分型
琼脂斜面纯培养。 立即送区或市疾控中心作进一步鉴定。 （传染病报告）
湖南省肿瘤医院 检验科 Clin Lab.HNZL 标题：粪便标本细菌学检验标准操作规程 文件编号：版本号：2 HNZLYY/LAB-SOP-WSW-607 生效日期：2013-07-01 编制人：陈建国 批准人：吴白平 审核人：肖平 修改号：0 发行部门：质量管理小组 页码：第 44 页 共 62 页 6参考文献：
《全国临床检验操作规程》（第3版）
湖南省肿瘤医院 检验科 Clin Lab.HNZL 标题：脓液及伤口标本细菌学检验标准操作规程 文件编号：版本号：2 修改号：0 HNZLYY/LAB-SOP-WSW-608 生效日期：2013-07-01 编制人：陈建国 批准人：吴白平 发行部门：质量管理小组 审核人：肖平 页码：第 45 页 共 62 页 1. 目的
规范脓及伤口标本细菌学标准操作规程，确保检验结果准确可靠。 2. 适用范围
脓液培养或涂片检查。 3. 标本
3.1 标本类型 脓液。 3.2 标本采集
3.2.1 开放性脓肿和脓性分泌物 用无菌盐水或75%酒精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡
深处采集两支拭子，一支为涂片检查用，一支作培养用。
3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内
（注明采集部位）送检。
3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入多功能培养瓶
或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。 3.3 标本拒收标准
3.3.1 标本标识与化验申请单不符。 3.3.2 标本不是无菌留取。
3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2h。 4. 试剂、仪器
4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板、相关生化试
剂等。
4.2全自动血培养系统、ATB Expression鉴定系统和TDR系统鉴定卡及药敏板、药敏纸片、
ATB板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。
4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2 培养箱等。 5. 细菌鉴定和药敏质控
参见质量管理。 6. 检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。
6.1 涂片检查 革兰染色镜检，报告“查见革兰×性菌，形似××菌”或报告”未查见细菌”。 6.2 培养
6.2.1 一般细菌培养 标本接种血琼脂平板和中国蓝琼脂平板（或EMB、中国蓝琼脂平板），
35℃培养18～24 h后，根据菌落特性和形态染色，作出初步判断，再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。
6.2.2 厌氧菌培养 取脓液标本接种厌氧血琼脂平板及其他厌氧选择平板，置于厌氧环境培