14
NH4C1培养液中培养1代后，只有一条区带介于14
N-DNA与15N-DNA之间。培养2代后则在14N-DNA区又出现一条带。有等量的―杂种链‖和轻链密度。这些结果只与半保留复制模型相符。全保留模型可以排除，但分散模型却不能排除。Meselson等又将第1代的14N/15N杂种链变性使双链分开，再将变性前后的双链和单链分别进行CsCl密度梯度离心。变性前杂种双链只有一种带，密度为1.717g/cm3，变性后两条单链的密度不同而呈现了两条带，一条为15N带，（1.740g/cm3），另一条为14N带（1.725g/cm3）。作为对照的是从肺炎球菌（D. pneumoniae）中提取的DNA，变性前后都只有一条带，密度为1.700g/cm3。这一结果完全符合半保留复制预期的结果，并否定了全保留模型和分散模型。按照半保留复制方式培养两
代，只能出现14N和14N/15
N两种DNA分子，随着代数的增加14N-DNA逐渐增加。而14N-15NDNA区带逐渐减弱。
②Taylor的实验：真核细胞的每条染色单体是由一条DNA双链组成，1958年Herbert Taylar用3H的胸腺密啶核苷酸处理蚕豆根尖细胞8小时，然后移入含有秋水仙素而没有标记放射性的培养液中。经标记处理后第一次分裂中期的染色体周围均显示放射性，每个染色体中有一条染色单体被标记，另一条染色单体未被标记。第二次分裂中期的染色体就只有一个显示有放射性，而另一个却没有。证明真核DNA复制也符合半保留模型。
③姐妹染色单体差别染色方法（sister-chromatid differential staining）：在复制过程中用胸腺嘧啶的类似物5-尿嘧啶（5-Bromodeoxy uridine，BUdR）可掺入到新合成的DNA中。在两细胞周期之后，一条染色单体中含有DNA分子的双链都被BrdU取代，而另一条染色单体只有一条DNA单链中含有BrdU。若用荧光染料染色，DNA双股都含有Brdu的染色单体的荧光强度要小于DNA的单股含BrdU的染色单体的荧光强度，在荧光显微镜下可观察到两条姐妹染色单体的荧光强弱不同。若用Giemsa染色，当双链都插入5-BudR时则染不上Giemsa，而一条插入5-BudR则可染色。若细胞的培养基加入5-BudR则第二复制周期时，两条姊妹染色体染色状况不同，一明一暗，称花斑染色体。
3.1.3 DNA复制过程的顺序性 3.1.3.1 边解链边复制
从SV40复制的早期电镜照片可见复制部分和未复制部分。
3.1.3.2 复制起点
DNA复制是从DNA分子上特定位置（原点，origin）开始，复制起点（origin）是DNA复制所必需的一段特殊的DNA序列。
噬菌体、细菌染色体、质粒和一些动物病毒的DNA通常具有明显的复制起点。酵母也有特异的复制起点，在细胞周期S期染色体复制时起重要的作用。真核生物的复制起点很复杂，现在还难于在分子水平上阐明其特征。大多数原核生物基因组和细菌质粒只有一个Ori位点，而真核生物染色体中有多个Ori。例如，果蝇染色体DNA约有3000个Ori位点。
3.1.3.3 复制方向
DNA复制方向的可能性：研究DNA复制的方向常用温度敏感性变异菌株结合放射自显影技术。大肠杆菌的一个温度敏感株在42℃时能使DNA在完成复制后不再开始新的复制过程，而在25℃时复制功能恢复。将此温度敏感株在同一时间开始复制，细菌同步生长。先将这种同步生长的突变株在含高比度3H-TdR中生长几分钟，再移入低比度3H-TdR中作脉冲标记。然后对菌体DNA作放射自显影分析。若复制是单向的，仅有一个高比度区，且高比度与低比度的放射性分布应该邻近。若复制是双向的，有两个分离的低比度放射性分布区。DNA可进行单向和双向复制，大多数DNA的复制是双向的。有些病毒（如腺病毒、Φ29噬菌体等）及线粒体DNA的复制是单向进行的，滚筒式属单向复制。SV40为5224bp的环形分子，有1个EcoRⅠ切点。中用EcoRⅠ酶切复制中的SV40得到复制眼大小不同的系列DNA分子，可见随复制眼扩大两侧DNA变短，说明复制从原点开始双向复制。
真核一般为多起点复制。
也可利用变形对DNA电泳迁移的作用来确定复制原点。例如用二维作图方法，即复制中DNA的限制性片段在第一维方向进行电泳，按分子量的大小分离。再在第二维方向电泳，第二维方向电泳移动主要由形状决定。不同复制中分子会有不同的路径，这可以通过它偏离双倍大小线形DNA分子的路线的程度来确定。复制起点的位置和复制叉的数目决定了限制性复制片段的形状，这些形状可通过不同的电泳路迹(实线)显示出来。虚线显示线形DNA的电泳路迹。
DNA非复制DNA的旁边复制的DNA在电镜下象只眼睛称复制眼（泡）
3.1.4 DNA的半不连续复制
DNA双螺旋的两条链是反向平行的，因此，在复制起点处两条DNA链解开成单链时，一条是5‘→3‘方向，另一条是3‘→5‘方向。DNA复制时，新生链延伸方向一条为3‘→5‘，另一条为5‘→3‘。但生物细胞内所有催化DNA聚合酶都只能催化5‘→3‘延伸。
3.1.4.1 半不连续复制的证据
Okazaki（冈崎）于1968年通过3H–脱氧胸苷酸（3H–dT）标记实验证明了半不连续复制。
①实验材料：T4感染的E. coli：野生型phage–T4；