生物化学实验报告
1/V = 4.6127x1[S] + 30.479 1/Km=6.61 Km=0.151
与前面Km对比，可知类型是：反竞争性抑制
5.6【酶活力测定】
表4-17 酶活力测定
样品Ⅰ 样品Ⅱ 样品Ⅲ 样品Ⅳ 样品Ⅴ 样品Ⅵ 测活缓冲1.25 1 1 1 1 1 液体积/ml 底物体积1.25 2.48 2.48 2.485 2.485 2.485 /ml 样品体积20(稀释 20 20 15 15 15 /μl 5倍)
表4-18 OD值
样品Ⅰ 样品Ⅱ 样品Ⅲ 样品Ⅳ 样品Ⅴ 样品Ⅵ 30s 0.168 0.03 0.013 0.158 0.083 0.066 60s 0.163 0.028 0.011 0.156 0.078 0.064 90s 0.157 0.027 0.01 0.154 0.077 0.062 120 0.153 0.025 0.009 0.153 0.075 0.058 150s 0.149 0.023 0.008 0.151 0.071 0.057 180s 0.142 0.021 0.007 0.149 0.067 0.055 210s 0.137 0.02 0.005 0.147 0.063 0.051 240s 0.134 0.019 0.146 0.048
表4-19 V平均
样品Ⅰ 样品Ⅱ 样品Ⅲ 样品Ⅳ 样品Ⅴ 样品Ⅵ
0.01975 0.00675 0.00333 0.00700 0.00833 0.00975 36
生物化学实验报告
规定UL=0.001OD/s，则 UⅠ=19.75UL UⅡ=6.75UL UⅢ=3.33UL UⅢ=7.00UL UⅤ=8.33UL UⅥ=9.75UL
5.7【蛋白含量测定】
37
生物化学实验报告
图4-10
相对迁移率（Rm）=蛋白质移动的距离/指示剂移动距离 标准蛋白的相对分子质量和移动距离：
38
生物化学实验报告
表4-20
标准蛋白 兔磷碱化酶 牛血清蛋白 兔肌动蛋白 牛硫酸酐酶 胰蛋白抑制剂
相对分子质量移动距离（cm） 相对迁移率 的对数 4.99 4.82 4.63 4.49 4.30 1 1.6 2.8 4.2 4.4 0.22 0.35 0.61 0.91 0.96 标准曲线相对迁移率1.210.80.60.40.204.2
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y = -1.1856x + 6.11852R = 0.9527蛋白分子量对数4.34.44.54.64.74.84.955.1
图4-11
生物化学实验报告
Marker迁移的距离：4.6cm
蛋白质Ⅰ相对迁移率=3.13/4.6=0.682 蛋白质Ⅱ相对迁移率=3.11/4.6=0.678 蛋白质Ⅲ相对迁移率=2.41/4.6=0.523 蛋白质Ⅳ相对迁移率=2.25/4.6=0.490 蛋白质Ⅴ相对迁移率=2.12/4.6=0.461
蛋白质ⅠlgMr=4.585 蛋白质ⅡlgMr=4.585 蛋白质ⅢlgMr=4.720 蛋白质ⅣlgMr=4.747 蛋白质ⅤlgMr=4.772
蛋白质Ⅰ Mr=38498 蛋白质Ⅱ Mr=38799 蛋白质Ⅲ Mr=52427 蛋白质Ⅳ Mr=55897 蛋白质Ⅴ Mr=59135
６实验过程及结果分析及感想
由于胶的形状并不尽如人意，以致在计算迁移率时会造成一定误差。 这次试验给我印象最深的是我们做的三次胶，一次凝，一次不凝，一次溴酚蓝没有了，到现在我还在反思是试验的失误还是什么其他问题导致。其次便是后面的测定实在是很庞大，不断的测OD值给了我很深的印象。
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