台上操作，标准溶液要注意保管。测定后的3，4－苯并芘废液应集中起来，统一处理。所用过的玻璃仪器，必须用铬酸钾－硫酸洗液浸泡4h以上，最好浸泡过夜后用水洗净。 (6)色谱条件的选择
①流动相：用甲醇和水调节其不同比例，在每种比例下，变化流量，固定柱温，用萘、联苯、菲、蒽混合样品测量在各种条件下的保留值、柱效和蒽菲的分离度，结果见表6－10。
表6－10 流动相极性、流量变化对多环芳烃保留值、柱效和分离度(菲、蒽)的影响
续表
流动相甲醇和水的比例影响分离组分的保留值、柱效和分离度。如增加甲醇，保留时间减少，柱效和分离度发生变化，这主要是由流动相极性变化所引起的。另外，流量对保留时间、柱效和分离度也有影响，如流量变大，则保留时间减小，柱效降低，分离度下降。因此，对于甲醇和水的比例以及流量均须严格控制恒定。
②柱温：提高柱温能缩短保留时间、增加塔板数(见表6－11)，这是由于温度增高，溶剂粘度减少，增加了溶剂在固定相中的渗透性，所以加快了分离；但温度过高，对低沸点溶剂(如甲醇)易形成气泡析出，影响结果。
表6－11 柱温对保留值、柱效和分离度影响
(7)标准和空气样品的色谱图
标准和空气样品的色谱图示于图6－12、图6－13、图样品测量结果列于表6－12。
6－14，空气
表6－12 大气飘尘中多环芳烃含量(ng/m3)
从色谱图上看到，二个环的仅知道萘和联苯，三个环的有蒽、菲二个峰，这在气相谱不易分开，而用液体色谱是可以分开的。四个环的芘和荧蒽基本能分开，和苯并〔a〕蒽是难分离的异构体，此法虽能分开，但不理想。五个环的有苯并〔e〕芘、苯并〔a〕芘和苝是能分开的。
仪器型号用北京分析仪器厂生产的SY01型高压液体色谱仪UV－254检测器得到多环芳烃标准曲线如图6－15。
二、纸层析－荧光分光光度法〔1〕 (一)原理
采集在玻璃纤维滤纸上颗粒物中的多环芳烃，经索氏提取或真空升华后，用苯洗脱浓缩，经乙酰化滤纸层析分离，分离出的苯并〔a〕芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点，用苯洗脱或斑点直接扫描，用荧光分光光度法定量。 (二)仪器 (1)层析缸 5L。
(2)紫外灯 附365或254nm滤光片。 (3)具塞比色管 10ml，刻度需校正。
(4)荧光分光光度计 用10mm石英比色皿，在激发波长385nm和发射波长400～410nm下测定荧光强度或附薄层扫描装置，用于荧光斑点直接扫描测定荧光强度。 其他仪器 同一法(415页)。 (三)试剂
(1)玻璃纤维滤纸 同一法(415页)。