实验六、纸色谱法的基本操作
一、目的要求：
掌握纸色谱的操作技术及应用。 二、实验原理：
纸色谱中滤纸为载体，滤纸上吸附的水为固定相，流动相在流动中将样品分离。 三、实验材料：
毛细管、色谱纸（6cm×20cm）色谱缸、吸管（1个）。精氨酸、脯氨酸、亮氨酸、茚三酮、正丁醇、醋酸。
四、 实验内容及操作步骤：
1、首先将精氨酸、脯氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、甘氨酸分别制成1％水溶液，被测样品：为上述几种氨基酸的混合水液，待用。 1、 取色谱纸1张（6cm×20cm）用铅笔在下端2cm处划一条起始线，在距起始线15cm
处划终止线。并在起始线上做好点样标记。
2、 点样 用毛细管将配好的溶液分别点在做好标记的色谱纸下端，注意原点直径为2mm
及点间距离约为1.5～2.0cm。
3、 展开 以正丁醇︰醋酸︰水＝7︰3︰1作为展开剂，倒入色谱缸内，再将点好样的
色谱纸垂于缸内，展开剂在起始线以下，盖好盖进行展开，至终止线时，取出色谱纸，挥干溶剂。
4、 显色 将0.2％茚三酮乙醇液喷在色谱纸上，用电吹风吹至100℃显色。 五、实验流程图：
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③显色 将0.2％茚三酮乙醇液喷在色谱纸上，用电吹风吹至100℃显色。
实验说明及注意事项
纸色谱点样时要注意保持洁净，不要对着色谱纸讲话或用手触及到色谱纸的有效部分。以免唾液及汗液中的氨基酸影响层析结果。
附 试剂的配制：
①精氨酸、脯氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、甘氨酸分别制成1％水溶液： ②0.2％茚三酮乙醇液：取茚三酮0.2克加乙醇溶解成100毫升。（注意配制茚三酮乙醇液溶液时要戴手套，以免手上的汗液中的氨基酸与茚三酮显色）即可。 ③展开剂：正丁醇︰醋酸︰水＝7︰3︰1作为展开剂
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实验七、 维生素B1片的含量测定
一、实验目的：
掌握用紫外分光光度法测定维生素B1片的含量。 二、仪器药品：
紫外分光光度仪 分析天平
称量瓶研钵 漏斗
容量瓶(100ml)移液管(5ml) 洗耳球
维生素B1片 盐酸 三、实验原理：
维生素B1在紫外光区具有特征吸收峰，它随溶液的PH的变化而变化，在PH为2的溶液中，在246nm波长处有最大吸收。该片剂的溶液经干燥滤纸滤过，辅料不再干扰测定。 四、实验步骤：
（一）原文：取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉约 g（称取细粉量g = 25mg/规格mg×平均片重g）于100ml量瓶中（约相当于维生素B125mg）加盐酸（9→1000）溶液约70ml，振摇15分钟使维生素B1溶解。加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀。用干燥滤纸滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液5ml置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀。照分光光度法在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17CLN4OS
%?HCl的吸收系数?11cm为421计算，即得。
（二）根据原文拟定操作步骤：（略见操作流程图）
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五、操作流程图：
高于原溶液浓度，因干燥滤纸吸水要达到饱和。
*初滤液：首先将需滤过的溶液一部分倒入漏斗中，待其全部滤完，此部分滤液可称为初滤液。初滤液浓度
测定吸收度：
（一）准备
1)、开启电源，按“电源”开关，钨灯亮；按“氢灯”开关，氢灯电源接通；再按“氢灯
触发”按钮，氢灯亮，预热30分钟。
注：选择光源（氢灯的工作范围是200～360nm；钨灯工作范围是360～1000nm）。仪器后背部有钨灯开关，如不需要钨灯时可将它关闭。
2) 选择测定波长。将空白溶液和样品溶液依次序放入样品架上，暗箱盖无需关闭。 （二）测定
仪器零点的校正：
（1）选择开关置于“T”。（2）灵敏度旋钮置“1”（放大倍率最小）。（3）调节“0％”（T）旋钮，使数字显示为“00.0” 空白溶液测定。（1）将空白溶液置于光路，（2）盖上暗箱盖，调节“100％”“T”，使数字显示为100.0（此时不能再动“0％”的旋钮）。
注：如果显示不到100.0，可适当增加灵敏度的档数，同时应重复“1”的操作。 样品溶液的测定：
（1）透光率的测定 将样品溶液置于光路中，数字显示器上直接读出被测溶液透光率“T”值。
（2）吸收度的测定 重复1、2的操作 将选择开关置于“A”，旋动吸光度调整旋钮，使数字显示为“000.0”。将样品溶液移入光路，数字显示器上直接读出吸收度A值。 （三）结束工作
1、取出样品架上溶液。2、关闭光源和电源。3、待冷却，罩上布罩。
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六、计算公式 标示量%=［A样×
1100?（1100?5100） ×平均片重g］×100% 421×mSg ×标示量g
七、记录：
W1 （称取平均片重 称量瓶 + 药品） g W2 （称量瓶重） g 称得的20片药品重量 g W3 (称量瓶 + 药品粉末) g W4 (剩下的药品粉末和称量瓶重量) g mS (称得的药品重量) g 测得的数据：λ﹦246nm A 标示量% 结论：规定本品含维生素B1 （C12H17ClN4OS.Cl）应为标示量的90.0～110.0% 结论
规定本品含维生素B1（C12H17ClN4OS.Cl）应为标示量的90.0～110.0%
实验八、马来酸氯苯那敏片含量均匀度检查
一、实验目的
掌握马来酸氯苯那敏片含量均匀度的操作、计算和结果判断。
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