杏鲍菇工厂化高效栽培技术材料
三 接种操作技术
(一)杏鲍菇菌种分类
杏鲍菇的菌种是人工培育的、供进一步繁殖用的纯菌丝体,一般分为三级:母种、原种、栽培种。
1.母种
现在生产上一般采用子实体组织分离或孢子分离培育的纯菌种,采用孢子分离培育母种。图3-1。
2.原种
由母种转接入已经高压灭菌、并盛有麦粒、木屑培养基的菌种瓶中,转扩而成的菌种,称为原种。一支试管母种接种6瓶原种,22℃避光培育30天左右培育成原种。图3-2。
图3-1母种 图3-2原种
3.栽培种
由原种转扩而成的菌种称为栽培种,一瓶原种转扩37瓶左右的栽培种,22℃避光培育30天左右培育成栽培种。图3-3。
图3-3 栽培种
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(二)菌种制作的设施与设备
1.主要设施
洗涤室,配料室,接种室,接种箱(图3-4),培养室,高压灭菌锅。
2.接种工具
钢钩;接种匙;镊子,酒精灯,毛刷;小型喷雾器;小铲(图3-5,图3-6)。
21 63 32
63 122 单位:cm
图3-4 接种箱结构图及实景
图3-5 接种箱消毒与清洁设备 图3-6 接种工具
(三)接种程序
1.母种的制作
利用杏鲍菇的成熟孢子来分离纯化菌种。
2.消毒
(1)接种工具及菌种瓶的消毒。接种前,将接种工具和菌种容器放入新洁尔灭消毒液中,浸湿2-3秒种,注意不要将消毒液灌入菌种瓶内,以免杀死菌种;蘸有消毒液的接种工具要用75%酒精棉球擦拭干净后,再在酒精灯下灼烧3-4秒,
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再用于接种。
(2)接种箱的消毒。用新洁尔灭消毒液浸湿的抹布将接种箱擦拭一遍,用新洁尔灭消毒液喷雾,除尘杀菌;要将一定数量的待接种的原种瓶和装有母种的试管以及钢钩放入接种箱内(待接种的原种瓶放入时,要一个一个的仔细检查,瓶子是否破损,原种培养基是否有积水),然后再次消毒液喷雾消毒,检查物品是否齐全,将瓶架横放,将保菇王消毒粉末两包放在瓶架上,点燃后,关闭接种箱,熏蒸40分钟。见图3-7。
图3-7 消毒药品及工具
3.接种过程
(1)原种接种
1用75%酒精棉球擦拭双手,将打火机,75%酒精棉球拿进接种箱。 ○
2点燃酒精灯,用75%酒精棉球擦拭钢钩,将其在酒精灯上用外焰灼烧3-4○次,进行彻底消毒。
3左手用拇指和食指托住试管中下部,右手用拇指、食指和中指握住钢勾○
的上部,将试管的棉塞取下,用火焰封住母种试管的管口,在无菌条件下,把灼烧后已冷却的钢钩伸进试管,将斜面培养基顶部3-4厘米的菌落用钢勾划出,取用新的棉球将试管口及试管内壁擦拭一遍,将钢钩在酒精灯上重新灼烧,然后将剩余部分平均分成六部分,试管口对准酒精灯,防止杂菌侵染。
4用钢勾在斜面上挖取一块菌块,迅速转移到待接种的原种瓶内,抽出钢○
钩,立即灼烧棉塞,将瓶口塞紧。接种接完后,贴好标签,将培养瓶种的菌落置于瓶的中央,然后放入原种培养室内,菌种培养室22℃进行培养。
5接种后,将接种箱清理干净,用蘸有消毒液的抹布仔细将培养箱擦拭,○消毒液喷雾消毒。 (2)栽培种的接种
接种前要将一定数量的待接种的栽培种瓶和装有原种的培养瓶消毒,同上。
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1同原种接种a。 ○
2同原种接种b。 ○
3用酒精棉球擦拭原种瓶瓶口,将瓶口处的菌被擦掉,然后用接种匙将表○
层2-3厘米的菌被除掉,取用新的酒精棉球,将瓶壁,瓶口以及接种匙擦拭一遍,擦拭时尽量不要接触新的菌层,再次将瓶口内外在火焰上灼烧。
4接种匙灼烧,冷却后,插在原种瓶里,将瓶横放到瓶架上,瓶口对准酒○
精灯,封住原种瓶瓶口,将待接种的栽培种瓶子的瓶口酒精灯,确保在无菌条件下操作,迅速将塞子拔下,将一勺原种转接到栽培瓶中,取用新的棉塞,将套在棉塞上的橡胶圈取下,在接种箱壁上撞两下,然后将栽培瓶瓶口塞紧;菌种培养室22℃避光培育栽培种。
5接种完毕后,将瓶塞和废弃物分类,接种箱清理干净,用蘸有消毒液的○
抹布擦拭干净,喷雾消毒。
接种如图3-8。
(3)栽培袋的接种
操作程序同(2)栽培种接种。
栽培袋在接种箱中布置 接种
图3-8 接种箱及接种操作
(四)养菌
1.菌丝培养
栽培菌袋接上菌种后,移入培菌室进行发菌。要求培养环境干净、干燥、微光、通风良好发菌初期室内温度22~25℃,3d后菌种萌发,5d后菌丝开始吃料生长,7d后菌丝生长优势即可表现出来。10d后菌丝的积累数量增长加速,料内温度会自然升高,此时应注意控制料温,防止料温超过25℃,可通过加强室内的通风换气降低料温。
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将接好菌种的栽培袋及时转移到养菌房进行菌丝培养。要求养菌房干净、干燥、通风良好、远离污染源。培养袋放置密度为110个/m2左右。 (1)培养条件控制
发菌期间的管理,主要是温、湿、光及氧的控制。
1温度。养菌室温度分为三个阶段:菌丝萌发阶段的十多天里温度控制在○
22℃;菌丝伸长阶段的十多天温度控制在21℃;然后温度控制在23-24℃进行培养。温度通过图3-9设备控制。
图3-9 温控设备
2湿度。培养室空气相对空气湿度对杏鲍菇菌丝培养阶段的直接影响较小,○
主要是空气湿度过大,会引起棉塞返潮,从而引起污染,过于干燥又会引起栽培袋中水分蒸发散失,阻碍菌丝的生长,影响菌丝的生理成熟和出菇。
3通气。发菌期间要避免干燥,定期用二氧化碳测定仪测定养菌房内空气○
中二氧化碳的含量,经常通风换气。通风安排见表3-1。
表3-1 养菌期间通风时间安排
通风时间 4:006:008:00-8:20 10:00-10:20 14:00-14:20 16:00-16:20 18:00-18:20 20:00-20:20 -4:20 -6:20 4光照。杏鲍菇在菌丝生长阶段不需要光线,因此,培养期间要注意遮光,○
养菌期间无光照设备,进行暗培养。
原种、栽培种进行培养后,符合原种、栽培种的质量标准的用于接种。 (2)菌种质量标准检查
1容器:检查菌种包装容器是否完整,如有缺口或破损,封口不严,一旦○
发现此类情况,不能做菌种使用。
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