制工作曲线。
四、操作要点：
1、 试样溶解至发色过程中，应严格避免磷酸混入。
2、 显色温度应控制在27℃左右为宜，温度过高会受到硅的干扰，过低显色温度慢而且显色不完全，使结果偏低。
3、 亦可用含量相近的标样，计算含磷量。
铜的测定
一、 方法提要：
用柠檬酸铵掩蔽铁等干扰元素，在氨性溶液中，在有保护剂胶水存在下，二价铜与铜试剂生成橙色胶状溶液进行比色测定。
二、试剂：
胶水溶液：溶解动物胶2.5g，于250ml沸水中，加浓氨水100ml，柠檬酸氨（50%）100ml，以水稀至500ml。
铜试剂：（0.2%），存在于棕色瓶中。
铜标准溶液：称取纯铜0.1g，溶于少量稀硝酸中，以水稀至100ml，吸取此溶液10ml于500ml量瓶中，以水稀至刻度，每毫升含铜0.02mg。
三、操作步骤：
称取试样溶液5ml两份，分别置于50ml量瓶中，一份加胶水溶液15ml，以水稀至刻度，摇匀，作为参比液，另一份加胶水15ml，边摇边加铜试剂（0.2%）5ml，以水稀至刻度，摇匀作为显色液。 于分光光度计上，在500ml波长处，用2cm比色皿测定吸光度，在工作曲线上查得试样含铜量。 工作曲线的绘制：
吸取铜标准溶液0 ,1，2，3，4，5ml各两份分别置于50ml量瓶中，按上述分析方法显色测定吸光度，绘制工作曲线，每毫升铜标准溶液相当于含铜0.08%。
四、操作要点：
1、 加铜试剂时必须摇动，否则溶液易混浊，影响分析结果，另外，氨水量不足溶液呈褐色。
2、 显色后应立即比色。
3、 因柠檬酸铵对玻璃有腐蚀作用，比色完毕，应立即将比色皿清晰干净。
镍的测定
一、 方法提要：
在酸性溶液中，由于过硫酸铵和碘的存在，镍变成四价，与丁二肟作用生成红色碘离子。
二、试剂；
柠檬酸铵；（50%）
碘溶液：（0.1mol/L），称取碘12.7g，碘化钾25g，加少量水溶解后，以水稀至1000ml。
二甲基乙二醛肟：（0.1%），取二甲基乙二醛肟1克，溶解于500ml氨水中，过滤后，以水稀至100ml。 镍标准溶液：称取纯镍0.1g，于少量稀硝酸中溶解，以水稀至1000ml。
三、操作步骤：
称取试样溶液5ml于50ml量瓶中，加柠檬酸铵（50%）5ml，碘溶液2.5ml，边摇边加二甲基乙二醛肟（0.1%）10ml，以水稀至刻度，摇匀。
于分光光度计上，在530nm波长处，以水为参比液，用1cm比色皿，测定吸光度，在工作曲线上查试样含镍量。
工作曲线的绘制：
吸取镍标准溶液0 ,1，2，3，4，5ml分别置于50ml量瓶中，按上述分析方法显色测定吸光度，绘制工作曲线。
四、操作要点：
1、 所加试剂量必须准确，并边摇边加。
2、 显色后应立即比色。